北大生命科學學院劉東課題組應用CRISPR-Cas9基因組編輯(genome editing)技術,在模式生物線蟲中成功實現了不同類型的基因打靶:1、在性腺特異表達Cas9的轉基因線蟲中,通過飼喂基因靶點特異的gRNA或直接向線蟲性腺注射Cas9和gRNA(DNA或RNA),均獲得了可遺傳的突變體;2、在非性腺表達Cas9的轉基因線蟲中,通過飼喂基因特異的gRNA獲得了體細胞突變體;3、利用熱激蛋白基因啟動子驅動的轉Cas9基因線蟲,該飼喂CRISPR-Cas9系統(tǒng)實現了不同發(fā)育時期的體細胞基因突變。飼喂CRISPR-Cas9系統(tǒng)可省時、高效地實現大規(guī)模特定基因定向敲除和突變體篩選,有潛力成為線蟲反向遺傳學研究的新型工具。本研究相關論文“Heritable/Conditional Genome Editing in C. elegans Using a CRISPR-Cas9 Feeding System”近日已在線發(fā)表在《細胞研究》雜志上。
建立線蟲CRISPER-CAS9飼喂系統(tǒng)并成功獲得突變體和組織特異性基因敲除個體
該研究成果有力推動了劉東實驗室“基因間區(qū)長非編碼RNA的篩選和功能分析”課題的進展,部分延續(xù)了前期非編碼RNA的工作(Liu et al., 2011. Cell Res. 21:1605-1618,劉東與樊啟昶老師共同指導完成)。博士研究生劉朋朋、隆例江和熊鍇為該研究論文的共同第一作者,劉東為通訊作者。本研究得到生物膜和膜生物工程國家重點實驗室、國家自然科學基金委、科技部和北京大學-清華大學生命聯合中心的資助。
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